基质辅助激光解吸/电离(MALDI)

基质辅助激光解吸/电离 (MALDI) 是一种用于质谱分析的软电离技术,用于分析非挥发性或热不稳定的较大分子。 该技术允许对生物分子(例如 DNA、蛋白质、肽和糖)和大型合成有机分子(例如聚合物、树枝状聚合物和其他大分子)进行识别和空间分布研究。

MALDI 是一种独特的技术,可以对整个分子进行解吸和电离,这与更传统的电离技术不同,后者通常会导致目标物质的大量碎裂。 最初,样品与选定的基质混合,例如 α-氰基-4-羟基肉桂酸,并沉积在目标板上。 该板受到来自脉冲激光的光子的轰击,导致基质解吸和电离。 随后,能量从基质转移到样品分子。 这种温和的能量转移过程使样品分子保持完整,但现在处于气相,产生质子化/阳离子化或去质子化/阴离子化的分子离子。

使用飞行时间质谱仪 (ToF MS) 分析离子。 使用这种技术,离子的质量通过根据离子的质荷比 (m/z) 及时分离来确定。 在 ToF MS 中扫描整个质量范围以获得完整的质谱。 ToF MS 使人们能够高精度地确定离子的分子质量。 在大多数情况下,获得特定分子的质量不足以进行唯一识别。 获取此信息的途径是串联质谱法(MS/MS 或 ToF/ToF)。 首先,选定的离子被分离出来,随后被破碎。 然后在第二个 ToF 质谱仪中分离母离子和碎片离子,产生碎片模式,形成感兴趣分子的特征指纹。

理想用途

  • 准确的分子量测量
    • 样品识别 
    • 确定样品的纯度 
    • 验证氨基酸取代 
    • 验证翻译后修改 
  • 反应监测
    • 酶反应 
    • 化学改性 
    • 蛋白质消化 
  • 氨基酸和寡核苷酸测序
    • 确认氨基酸序列 
    • 从头表征肽 
    • 通过数据库搜索从蛋白水解片段中用序列“标签”鉴定蛋白质 
    • 寡核苷酸的表征或质量控制 
  • 蛋白质结构
    • 通过H / D交换监测蛋白质折叠 
    • 蛋白质 - 配体复合物的形成 生理条件 
    • 大分子结构测定 
  • 细菌和真菌鉴定
    • 鉴定细菌和真菌分离物  
  • 内部化合物的空间分布 生物组织或 非生物的 系统  

优势强项

  • 快速,灵敏,高质量准确,高通量 

缺点限制

  • 软电离不适合所有分子。 宽多分散性聚合物的质量歧视 

技术规格

  • 获得的信息:
    • 各组分的组成,分子量和结构信息 
    • 定性和(半)定量 
  • 样本类型: 固体或液体(溶于水性缓冲液或溶剂中) 如 DMF或DCM) 
  • 质量范围: 50 - 100000 g / mol 
  • 质量精度:  
    • 质量的0.1%(1000 ppm)  
    • > 4000克/摩尔 
    • 质量的0.005%(50 ppm)或更好 
    • <4000克/摩尔 
    • 50×10-3 在MS / MS模式下的g / mol 
  • 质量灵敏度: Compound 和矩阵 依赖的 
  • 横向分辨率(成像): 20 x 20 微米 

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